一、 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

表格一：實(shí)驗(yàn)儀器

表格二：試劑

二、 實(shí)驗(yàn)步驟

收集生長狀態(tài)良好的神經(jīng)干細(xì)胞，消化并調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，分于 96 孔板，

每孔 100μL，5000 個細(xì)胞/孔。

細(xì)胞置于 37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜后，小心棄去培養(yǎng)基。

根據(jù)藥物在細(xì)胞溶液中的終濃度使用細(xì)胞培養(yǎng)液配制相應(yīng)的藥物儲備液，隨后加入至相應(yīng)培養(yǎng)液中形成不同濃度的工作液（藥物在工作液中的體積比為 5%）。每孔細(xì)胞分別加入 100μL 相應(yīng)的工作液，每種濃度均設(shè) 3 個復(fù)孔。同時設(shè)置正常培養(yǎng)孔（只加入*培養(yǎng)液培養(yǎng)的細(xì)胞）和空白孔（沒有細(xì)胞，只加入相同量的*培養(yǎng)液）。

37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h 后小心吸去上清，加入 80μL 新鮮培養(yǎng)液

和 20μL MTT 溶液（5 mg/mL），并繼續(xù)培養(yǎng) 4h。

吸掉上清，每孔加入 150μL DMSO，置搖床上低速振蕩 10 min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶標(biāo)儀 490 nm 處測量各孔的 OD 值。

計(jì)算細(xì)胞生長抑制率%

實(shí)驗(yàn)組OD值-空白組OD值

＝1- ´100% 對照組OD值-空白組OD值

三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果