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    透射電鏡觀察細胞樣品實驗檢測服務
    更新時間:2021-11-16   點擊次數:1470次

    一、 透射電鏡觀察細胞樣品實驗檢測服務實驗儀器與試劑

    表格一:實驗儀器

    儀器

    透射電子顯微鏡

    超薄切片機

     

    表格二:試劑

    試劑

    PBSpH7.4

    無水乙醇

    丙酮

    1%鋨酸

    Pon812包埋套裝

    酸雙氧鈾

    醋酸鉛

     

    二、 實驗步驟

    1.  醛類固定:加入1mL 2.5%戊二醛溶液(PBS 稀釋),4度固定過夜;

    2.清洗:用PBS清洗4次,每次靜置15min

    3.鋨酸固定:用1%鋨酸溶液 4度固定2h

    4.清洗:用PBS清洗4次,每次靜置15 min

    5.脫水:用50%70%80%90%乙醇梯度脫水各靜置15min(70%乙醇中靜置過夜),再用100%乙醇脫水2次,每次靜置20min

    6.置換:用丙酮置換2次,每次靜置15min

    7.  浸漬:過程如下:

    A.丙酮:包埋劑=21(體積比)的浸漬液中浸漬1h

    B.丙酮:包埋劑=12(體積比)的浸漬液中浸漬4h

    C.純包埋劑浸漬2, 每次24h

    8. 包埋:將樣品放入盛有純包埋劑的包埋板中;

    10.聚合:將包埋板置于65℃條件下各聚合48h以上;
    11.修塊:將包埋頭修成梯形,且樣品表面積小于0.2mm×0.2mm

    12.超薄切片:切片厚度70nm

    13.染色:醋酸雙氧鈾染色 10min后清洗;

              醋酸鉛染色 10min后清洗;

    14. 上機檢測。

     


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