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    廣譜型DNA免核酸提取試劑介紹-M-DNA01
    更新時間:2021-12-23   點擊次數:1067次

    品牌:Labchant

    產品貨號:M-DNA01

    產品名稱:廣譜型DNA免核酸提取試劑

    產品規格:1ml 50T

    試劑盒應用

    本試劑盒中采用*配方,能夠快速的裂解各種常見樣本,無需反復離心,通過裂解方式獲得高質量的DNA。該DNA無需進行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCRLamp等擴增。

    DNA-Lysis可用于全血、血清、唾液、腹水、細胞、組織(例如淋巴結、脾臟、腎臟、扁桃體、肺、肌肉等)、拭子(例如血拭子、咽拭子)、鼠尾、病毒、革蘭氏陽性菌、大腸桿菌、葡萄球菌以及環境樣本(例如擦拭物、水樣本、鞋底)等樣品中基因組DNA的提取。

    本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等域。

    試劑盒組成

    組分

    M-DNA01

    DNA-Lysis

    1 mL

    保存條件

    4oC保存。使用將DNA-Lysis室溫充分混勻(若出現肉眼可見小球狀物質屬正常現象)。

    需要準備

    金屬恒溫浴、離心機

    使用方法

    一、不同樣品的處理方法

    1. 組織液的處理

    1)組織液包括組織研磨液、傳代細胞懸液、血清、唾液、尿液等。取20 μL組織液置于離心管中。

    2)取10 μL1)中組織液,加入20 μL DNA-Lysis

    3)混勻。

    4)置于55oC加熱5分鐘。

    512000rpm離心2-3分鐘,取上清。

    注意:組織液為血液樣品時,提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時,需要將提取物按照140稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中。

    2. 組織塊的處理

    1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

    2)用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),并將組織塊剪成肉泥狀,放在(1)中溶液中。

    3)混勻。

    4)置于55oC加熱5分鐘。

    512000rpm離心2-3分鐘,取上清。

    3. 菌類的處理

    1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。

    2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中。如果是培養液,取20μL放在(1)中溶液中。

    3)混勻。

    4)置于55oC加熱5分鐘。

    512000rpm離心2-3分鐘,取上清。

    二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應體系

    20 μL體系(推薦)

    2×TaqMix(With Dye)

    10 μL

    Forward Primer (10 μM)

    1 μL

    Reverse Primer (10 μM)

    1 μL

    Template DNA

    3 μL

    ddH2O

    5 μL

    注意事項

    1)在進行大量樣品檢測時,可將本試劑盒的試劑預分裝到8PCR管,用多通道移液器進行多樣本的處理。

    2)取樣的細胞量應當適中,濃度不宜過高或過低,處理后溶液應當以透明為宜。擴增細胞DNA時,取2000個細胞以內即可;擴增病毒基因時需要根據病毒的滴度決定取樣的細胞數量。

    3)樣品處理過程中應當防止交叉污染,推薦設置陰性樣品參與處理過程,以檢測環境的污染。

    4PCR的退火溫度可根據引物的預測Tm值減去5℃,或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度。

    5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個月。

    6)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。


    原創作者:上海創凌生物科技有限公司



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