厭氧菌只能在沒有游離存在時才能生長繁殖，在有氧的環境中不能生長甚至死亡，所以在研究分離及鑒定時，必須在低氧化還原電勢的厭氧環境中進行。根據物理、化學或兩者結合建立起來的厭氧菌的培養方法很多。操作簡單、要求相對低的培養方法有厭氧袋、皰肉培養基法、堿性焦性沒食子酸法等，對厭氧環境要求高、操作復雜的培養方法有厭氧手套箱和Hungate技術。厭氧菌的培養基可分為液體培養基和固體培養基。其中厭氧罐法有如下的原理：

　　1.厭氧罐體的結構

　　目前使用的厭氧罐的罐體采用透明聚碳酸酯硬質塑料或不銹鋼制成。圓形罐蓋的周邊凹槽內嵌有橡皮圈，能使罐體和蓋密封。罐體與罐蓋之間有一個大的金屬螺旋夾，可使罐體密閉。罐體內蓋的正中下方，有個金屬絲網盒或金屬盤，用于放催化劑。

　　2.厭氧罐的原理

　　原理是用物理或化學的方法把密閉容器中的氧除去，制造一個無氧環境。常用的方法是油氣換氣法和氣體發生袋法。

　　抽氣換氣法：先把需厭氧培養的平板或液體瓶放入真空厭氧缸或厭氧罐中，再放入鈀粒催化劑(可使罐中的氧與氫反應生成水，除去氧)和美藍指示劑(缸中有氧時，指示劑為藍色，缸中無氧時，指示劑變無色),然后利用真空泵對真空厭氧缸或厭氧罐抽真空，再反復充入無氧的氮氣3次，最后充入80%的氮氣、10%的氫氣和10%二氧化碳的混合氣體。鈀粒能夠促使混合氣體中氧反應掉，美藍指示劑顯示無色，則厭氧環境形成。鈀粒催化劑用過后，經干熱2h后可重復使用。打開觀察培養物后需重新抽氣換氣。

　　該法的特點是只利用化學方法造成無氧環境，簡便易行。該方法是在厭氧罐中放一個氫氣、二氧化碳氣體發生袋、催化劑、美藍指示劑。在鈀粒催化劑的作用下，罐中的氧氣和氫氣反應生成水，從而造成罐內的無氧環境。氣體發生袋是由一丸硼氫化鈉氯化鈷合劑、一丸碳酸氫鈉檸檬酸合劑及一片濾紙條組成。使用時剪去指定部分的一角，加入10 mL水，水沿濾紙滲到兩個試劑丸上，發生反應，產生氫氣和二氧化碳。

　　使用時，加水后應立即放入罐中并密閉，即可厭氧培養。