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    NuSmart植物組織PCR試劑盒免核酸提取Nu-P01產品更新內容
    更新時間:2023-02-22   點擊次數:836次

    試劑盒應用


    本試劑盒適用于煙草、擬南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麥等葉片和種子的PCR、熒光定量PCR檢測。使用該試劑盒無需液氮研磨,無需使用有機試劑,無需重復離心便可獲得用于PCR 反應的基因組模板。

    依托Nu-Smart®平臺PL-DNA Lysis 采用配方,5 分鐘內獲得花瓣、花蕊、種子、葉片、根、莖等樣本的基因組DNA。葉片僅僅需取材1-4mm,取樣量小,減少對樣品的損耗。

    預制的2× Plant SuperTaqMix 只需要加入引物和模板DNA 即可進行PCR 反應,減少移液次數,實現高通量擴增。該體系中添加有電泳緩沖液和染料,PCR 結束后直接進行瓊脂糖凝膠電泳,使用方便快捷。

    本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

    試劑盒組成

    保存條件

    -20oC 保存。

    PL-DNA Lysis 和2× Plant SuperTaqMix 經常使用可4℃保存,避免反復凍融。

    需要準備

    金屬恒溫浴、PCR 儀

    使用方法

    一、不同樣品的處理方法

    1. 葉片的處理

    (1)用眼科剪或葉片取樣器剪取1-4mm 的葉片。

    (2)加入20 μL PL-DNA Lysis。

    (3)充分混勻。

    (4)置于55℃作用5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

    2. 種子和果實的處理

    (1)研磨后種子或1-2mm 果肉放入離心管中。

    (2)加入20 μL PL-DNA Lysis。

    (3)充分混勻。

    (4)置于55℃作用5 分鐘。

    (5)10,000rpm 離心1 分鐘,上清即為DNA 模板。

    二、推薦PCR 反應體系

    ※:引物濃度可以在0.1-0.5 μM 范圍內進行調節。

    三、按照以下方法設定PCR 反應

    注意事項

    一、試劑盒使用前注意事項

    (1)所有試劑應按照溫度儲存。請勿反復凍融。

    (2)使用前后均需要對操作區進行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均

    需使用商品化的無酶耗材。

    (3)PL-DNA Lysis 頻繁使用,可在4℃保存。長期不使用可放-20℃保存。

    二、樣本注意事項

    (1)不同葉片使用不同的取樣器進行處理,防止交叉污染導致檢測結果偏差。

    (2)葉片剪取不宜過大,以1-4mm 為宜。

    (3)種子樣本大小不一,建議研磨后使用。

    三、試劑盒使用過程中注意事項

    (1)PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。

    (2)整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,減少環境污染。

    (3)2× Plant SuperTaqMix 包含染料,可在反應結束后直接進行瓊脂糖凝膠電泳。

    四、試劑盒使用后注意事項

    (1)PL-DNA Lysis 處理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 個月,如需長期保存,可離心后取上清置-80℃保存。避免反復凍融,防止基因組斷裂。

    (2)PCR 反應完成后,嚴禁在實驗區開蓋。應在污染區進行瓊脂糖凝膠電泳,防止氣溶膠污染。

    (3)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。

    檢測實例

    常見問題解析



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