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    NuSmart微生物PCR試劑盒Nu-Mi01產品應用及其介紹
    更新時間:2023-03-22   點擊次數:1020次

    試劑盒應用


    本試劑盒適用于真菌(例如酵母、霉菌、擔子菌)、細菌、病毒等微生物擴增。無需研磨,無需酶

    類消化處理,無需經過硅膠膜或磁珠提取純化,只需要將樣本放入專用裂解液中,保證基因組完整

    性。操作簡,只需要10-15 分鐘即可將裂解物產物作為擴增模板,加入到2× MIC Smart Mix 中。2× MIC

    Smart Mix 包含修飾的DNA 聚合酶,相較于普通PCR,具有更高的保真度和更高的產量。PCR 產物

    的3’含有A 末端,可直接克隆到T 載體。

    本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

    試劑盒組成

    保存條件

    -20oC 保存。

    MIC Buffer 和2× MIC Smart Mix 長期使用可放在4℃,避免反復凍融。

    需要準備

    金屬恒溫浴、PCR 儀

    使用方法

    一、不同樣品的處理方法

    1. 酵母菌/細菌/病毒/霉菌等培養液

    (1)取10μL 培養液和20μL MIC Buffer 充分混勻。

    (2)置于55℃作用5 分鐘,溶液即為DNA 模板。

    2. 酵母菌/細菌/霉菌菌落

    (1)挑取單菌落置于500μL 生理鹽水中,渦旋混勻。

    (2)加入20 μL MIC Buffer,充分混勻。

    (3)置于55℃作用5 分鐘,溶液即為DNA 模板。

    3. 蘑菇類或者組織

    (1)方法一:剪取1-4mm 菌蓋或者組織,加入20μL MIC Buffer 充分混勻。

    方法二:綠豆大小菌蓋或者組織塊放入組織勻漿器中研磨1-2 分鐘。取10-20μL 與20μL MIC

    Buffer 充分混勻。

    (2)置于55℃作用5 分鐘,溶液即為DNA 模板。

    二、推薦PCR 反應體系

    三、按照以下方法設定PCR 反應

    注意事項

    一、試劑盒使用前注意事項

    (1)所有試劑應按照溫度儲存。請勿反復凍融。

    (2)使用前后均需要對操作區進行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均

    需使用商品化的無酶耗材。

    (3)2× MIC Smart Mix 頻繁使用,可在4℃保存。長期不使用可放-20℃保存。

    二、試劑盒使用過程中注意事項

    (1)PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。

    (2)整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,減

    少環境污染。

    (3)2× MIC Smart Mix 包含染料,可在反應結束后直接進行瓊脂糖凝膠電泳。

    (4)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。



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