本試劑盒采用裂解液DPP 在10 分鐘內(nèi)完成植物葉片、根、莖、花蕊、種子等裂解、提取和純化。提取對象包括棉花、馬鈴薯、鐵皮石斛等。整個提取過無需使用蛋白酶K 等酶類制劑。提取DNA可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文庫構(gòu)建等。
本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。
保存條件
室溫保存一年。
自備材料
水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、無DNase 和無RNase 離心管、β-巰基乙醇、RNaseA（10mg/mL，或貨
號QR0101）
使用方法
1. 20-100mg 新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后，加入700μL 裂解液DPP 和35μL β-巰基乙醇，渦旋30秒。
2. 55℃孵育1 分鐘。備注：淀粉含量高的樣本直接進(jìn)行步驟3。
3. 12,000rpm 離心1 分鐘，吸取500μL 上清液。
4. （選做）加入5μL RNase A（10mg/mL），室溫靜置5-10 分鐘。
5. 加入250μL 無水乙醇，上下顛倒混勻。
6. 全部加入DNA 吸附柱中，12,000rpm 離心1 分鐘，倒掉收集管中廢液。
7. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DPW1，12,000rpm 離心30 秒，倒掉收集管中廢液。
8. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DPW2，12,000rpm 離心30 秒，倒掉收集管中廢液。
9. 重復(fù)步驟8 一次。
10. 12,000rpm 離心2 分鐘，倒掉收集管中廢液。
11. 將DNA 吸附柱放入新無DNase 和無RNase 離心管中，加入30-50μL 洗脫液P，室溫放置1 分鐘。
12. 12,000rpm 離心2 分鐘，得到DNA 溶液，-80℃保存。
注意事項
1. 經(jīng)常更換手套，防止DNA 污染。
2. 使用無DNase 無RNase 的吸頭和離心管，防止DNA 降解。
3. 常更換吸頭，防止交叉污染。
4. 動作輕柔，防止基因組DNA 斷裂。
5. 為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液P 置于65℃水浴后再使用。
