SILAC-exosome定量分析蛋白組學服務

一、簡介：

Exosome（外泌體）是具有脂質雙層膜結構、直徑約為30-150nm、密度在1.13-1.21g/ml的膜性囊泡。在exosome的囊泡結構中含有細胞來源相關的蛋白質、核酸、脂質和小分子等物質，能作為信號分子傳遞給其他細胞以進行細胞間通訊。研究發現exosome在眾多生理、病理過程中發揮著著重要作用。鑒于不同細胞分泌的exosome具有不用的組成成分和功能，故而exosome有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用，此外，基于exosome的膜性結構，亦可作為靶向藥物的載體進行疾病治療。Exosome的這些特性使其成為當前的熱門研究對象。

Exosome在細胞中的蛋白質含量極低，分離并獲取足量的exosome蛋白是進行LC-MS分析的前提條件。SILAC結合LC-MS就能很好的進行exosome蛋白的定量比較分析，體現在：（1）SILAC是體內標記，自然在exosome中的蛋白質也是SILAC標記的；（2）所需的蛋白量少，SILAC標記的和未標記的exosome蛋白各15-20μg足夠進行MS鑒定與定量；（3）蛋白質提取和后續操作步驟極為簡單方便，只需提取exosome蛋白、定量、1:1混合即可。（3）蛋白質定量和分析軟件成熟（Maxquant和Perseus），結果分析方便直觀。

二、SILAC-exosome定量分析蛋白組學服務方案：

（一）整體服務：

只需客戶提供細胞即可，我方負責完成：

SILAC培養基制備。

細胞SILAC標記及標記效率MS檢測；

SILAC標記細胞與非標記細胞擴增、exosome分離及exosome蛋白質提取；

提取蛋白質定量、1:1混合、SDS-PAGE分離及染色；

切割條帶，分別進行LC-MS測試；

MS數據分析，完成蛋白質的鑒定及定量分析，篩選差異表達蛋白；

差異表達蛋白常規生物信息學分析；

（二）合作共贏方案：

原則是通過協商簽訂合同，雙方各完成一部分實驗內容。

客戶方需從我方購買相應的SILAC培養基及耗材。我方提供細胞SILAC標記的實驗方案，協助客戶完成細胞的SILAC標記過程。

標記完成后，需用LC-MS鑒定細胞標記效率。該步驟需交由我方完成鑒定。

終正式實驗的蛋白質樣品，需交由我方完成MS鑒定和定量分析。

三、其他特色：

SILAC培養基。我方能生產多種類型的SILAC培養基（K6R6、K4R6、K6R8、K8R10等），7-10個工作日發貨，免去客戶從國外進口SILAC培養基及其標記氨基酸的漫長貨期。

SILAC培養基，500ml起訂。

我方同時銷售SILAC相關的試劑/耗材（dialyzed FBS，filter等），歡迎咨詢。SILAC-exosome定量分析蛋白組學服務