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    ColProof植物DNA快速提取試劑盒Col-D02產品應用介紹
    更新時間:2023-03-22   點擊次數:984次

    試劑盒應用

    本試劑盒采用裂解液配方在10 分鐘內完成植物葉片、種子等的裂解、提取和純化。提取對象包

    括水稻、玉米、小麥等作物,也包括多糖多酚類植物(例如棉花、馬鈴薯、鐵皮石斛等)。整個提

    取過無需使用蛋白酶K 等酶類制劑。提取DNA 可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文

    庫構建等。

    本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

    試劑盒組成

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    保存條件

    室溫保存一年。

    自備材料

    無水乙醇、無DNase 和無RNase 離心管、β-巰基乙醇(選用)、RNaseA(10mg/mL,或貨號QR0101)

    使用方法

    1. 液氮研磨新鮮植物樣本(如葉片、種子、花蕊約20-100mg),加入700μL 裂解液DP,充分混勻,

    室溫靜置1 分鐘。

    備注:多糖多酚類樣本,每700μL 裂解液DP 中加入14μLβ-巰基乙醇,從而提高RNA 得率。

    2. (選做)加入5μL RNase A(10mg/mL),室溫靜置5-10 分鐘。

    3. 加入0.5 倍體積無水乙醇,上下顛倒混勻,12,000rpm 離心1 分鐘。

    4. 取700μL 上清加入DNA 吸附柱中,12,000rpm 離心30 秒,倒掉收集管中廢液。

    5. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DWA,12,000rpm 離心1 分鐘,倒掉收集管中廢液。

    6. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DWB,12,000rpm 離心30 秒,倒掉收集管中廢液。

    7. 重復步驟6 一次。

    8. 12,000rpm 離心2 分鐘,倒掉收集管中廢液。

    9 將DNA 吸附柱放入新無DNase 和無RNase 離心管中,加入30-50μL 洗脫液P,室溫放置1 分鐘。

    10. 12,000rpm 離心2 分鐘,得到DNA 溶液,-80℃保存。

    注意事項

    1. 經常更換手套,防止DNA 污染。

    2. 使用無DNase 無RNase 的吸頭和離心管,防止DNA 降解。

    3. 常更換吸頭,防止交叉污染。

    4. 動作輕柔,防止基因組DNA 斷裂。

    5. 為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液P 置于65℃水浴后再使用。


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